ISTRUZIONI PER L'USO
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USO PREVISTO
Il CD-Chex CD34
®
è una preparazione stabilizzata di sangue umano da utilizzare come controllo
completo nella valutazione delle cellule CD34 positive. È indicato per l’utilizzo con BD Biosciences
ProCOUNT™ Progenitor Cell Enumeration Kit, BD™ Stem Cell Enumeration Kit, Beckman Coulter
®
Stem-Kit™ e con i sistemi che utilizzano il protocollo ISHAGE per l’enumerazione di cellule CD34.
SOMMARIO E PRINCIPI DI IMPIEGO
L’enumerazione di CD34 tramite citometria a flusso fornisce una valutazione rapida e accurata della
frequenza di progenitori CD34 positivi in campioni di midollo osseo, sangue del cordone ombelicale
o sangue periferico proveniente da pazienti trattati con fattori di crescita emopoietici. La capacità
di quantificare le cellule CD34 è utile nei trapianti emopoietici.
Le cellule progenitrici CD34+ possono essere distinte in base alle proprietà di dispersione della luce
insieme agli antigeni di superficie. CD-Chex CD34 è progettato per rappresentare un campione di
sangue contenente cellule CD34 positive con caratteristiche simili alle cellule progenitrici: proprietà
di diffusione laterale basse/intermedie, espressione di CD34 e bassa espressione di CD45 (rispetto ai
linfociti). Quando viene colorato con anticorpi monoclonali per l'enumerazione delle cellule CD34+, il
controllo CD-Chex CD34 fornisce valori di riferimento per le cellule CD34 positive che rientrano nei
range riportati nel foglietto illustrativo.
REAGENTI
CD-Chex CD34 contiene leucociti ed eritrociti umani in una soluzione conservante.
PRECAUZIONI
1. Esclusivamente per uso diagnostico in vitro.
2. ATTENZIONE - Tutti gli emoderivati devono essere trattati come se fossero infettivi. Il materiale
di origine dal quale questo prodotto è stato derivato è risultato negativo ai test attualmente
richiesti dalla FDA. Nessun metodo di analisi conosciuto è in grado di garantire che i prodotti
derivati dal sangue umano non trasmettano agenti infettivi. Per gli esami del sangue specifici
richiesti dalla FDA, consultare la scheda Istruzioni (IFU) sotto Risorse nella pagina del prodotto
sul sito www.streck.com.
3. Questo prodotto non deve essere smaltito insieme ai normali rifiuti, ma con rifiuti di origine
sanitaria. Si consiglia lo smaltimento tramite incenerimento.
4. Questo prodotto è inteso per l'uso come fornito. La sua adulterazione tramite diluizione o
aggiunta di altri materiali nella fiala ne invalida qualsiasi uso diagnostico.
5. I prodotti CD-Chex CD34 non devono essere usati come calibratori.
6. Le SDS possono essere reperite nel sito web www.streck.com, richieste telefonicamente al
1 402-691-7510 o al fornitore di zona.
CONSERVAZIONE E STABILITÀ
Il CD-Chex CD34 è stabile fino alla data di scadenza purché conservato ad una temperatura
compresa fra 2 °C e 10 °C. Una volta aperto, il CD-Chex CD34 è stabile fino alla data indicata nel
foglietto illustrativo per la fiala aperta, purché conservato a temperature comprese fra 2 °C e 10 °C.
NON CONGELARE.
INDICAZIONI DI DETERIORAMENTO DEL PRODOTTO
Se i valori del CD-Chex CD34 non rientrano nel range previsto dal foglio illustrativo o se i granulociti
mostrano una perdita di forward scatter (FSC), procedere come segue.
1. Rivedere l’inserto della confezione del prodotto di controllo e la procedura operativa dello
strumento.
2. Controllare la data di scadenza del prodotto sulla fiala. Eliminare i prodotti scaduti.
3. Analizzare una fiala non aperta di CD-Chex CD34. Se i valori sono ancora al di fuori Dell’intervallo
Previsto, rivolgersi al servizio di assistenza tecnica Streck al 1 402-691-7510 oppure
visitare il sito technicalservices@streck.com.
4. L'agglutinazione della sospensione cellulare indica instabilità o deterioramento, nel qual caso il
prodotto non deve essere utilizzato.
ISTRUZIONI PER L'USO
CD-Chex CD34 è destinato a essere usato con i protocolli di enumerazione ISHAGE CD34.
1,2,3
1. Per l’allineamento dello strumento e l’analisi dei campioni attenersi alle istruzioni del fabbricante
dello strumento.
2. Togliere dal frigorifero una fiala di controllo e lasciarla stabilizzare a temperatura ambiente (fra
18 °C e 30 °C) per 15 minuti prima dell’uso.
3. Procedura di miscelazione
(non si raccomanda la miscelazione meccanica mediante vortex o
agitatore rotativo):
Per una dimostrazione video, visitare il sito www.streck.com/mixing
.
a. Tenendo la fiala in posizione verticale fra i palmi delle mani, rotolarla in avanti e indietro per
20-30 secondi.
b. Tenere la fiala dalle estremità tra il pollice e l’indice, e miscelare delicatamente capovolgendola
almeno 8-10 volte da un’estremità all’altra fino a sospendere completamente le cellule.
c. Aliquotare immediatamente dopo la miscelazione.
d. Durante questo periodo di test, è possibile eseguire analisi successive capovolgendo la fiala 5
volte prima della campionatura.
Nota: le fiale conservate per un periodo di tempo protratto possono richiedere una miscelazione
più accurata.
4. Dopo la campionatura, riporre il reagente di controllo in frigorifero affinché la stabilità del
prodotto rimanga inalterata fino alla data di scadenza per la fiala aperta.
5. Seguendo le istruzioni del produttore degli anticorpi, aggiungere in ogni provetta la quantità di
anticorpi monoclonali consigliata e miscelare delicatamente.
6. Incubare secondo le istruzioni del produttore degli anticorpi.
7. Aggiungere la quantità consigliata di agente lisante per GR e seguire le istruzioni del produttore.
8. Analizzare con citometria a flusso utilizzando il protocollo di laboratorio prestabilito.
LIMITAZIONI
1. Non è consigliato l'uso del CD-Chex CD34 con anticorpi diretti agli epitopi del CD34 di Classe I
e II.
2. Il controllo CD-Chex CD34 è concepito per l’uso con un agente lisante per GR e potrebbe non
fornire risultati che rientrano nel range di analisi se analizzato senza di esso.
RISULTATI PREVISTI
I valori medi di analisi forniti per ciascun parametro sono stati ottenuti da analisi replicate su
citofluorimetri adeguatamente compensati.
1, 2, 3, 4
I valori di analisi sono stati ottenuti usando reagenti
comuni per citometria a flusso. Fare riferimento alle Istruzioni per l’uso e all’analisi per le limitazioni
o le istruzioni specifiche per i reagenti.
Non appena si riceve un nuovo lotto di controllo, è opportuno che ciascun laboratorio stabilisca i
propri limiti e le proprie medie per ogni parametro. Le medie del controllo stabilite dal laboratorio
devono essere comunque comprese nell’intervallo previsto specificato per il controllo stesso. Gli
intervalli previsti elencati rappresentano le stime di variazione che si ottengono a causa della
differenza tra reagenti, protocolli dei laboratori, calibrazione dello strumento, manutenzione e
tecnica dell’operatore.
BIBLIOGRAFIA
1. Clinical and Laboratory Standards Institute, H42-A2, Enumeration of immunologically defined cell
populations by flow cytometry. Approved Guideline - Second Edition.
2. Keeney M, Chin-Yee I, Weir K, Popma J, Nayar R, Sutherland DR. Single platform flow cytometric
absolute CD34+ cell counts based on ISHAGE guidelines. Cytometry (Communications in Clinical
Cytometry) 1998; 34:61-70.
3. Sutherland DR, Anderson L, Keeney M, Nayar R, Chin-Yee IH. The ISHAGE guidelines for CD34+
cell determination by flow cytometry. Journal of Hematotherapy 1996; 5:213-226.
4. Marti G, Johnsen H, Sutherland R, Serke S. Letter to the editor: A convergence of methods for a
worldwide standard for CD34+ cell enumeration. Journal of Hematotherapy 1998; 7:105-109.
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INFORMAZIONI PER L'ORDINAZIONE
Per assistenza rivolgersi al reparto Servizio di Assistenza ai Clienti al numero
+1 402-333-1982. Per ulteriori informazioni visitare il sito Web www.streck.com.
GLOSSARIO DEI SIMBOLI
Vedere la scheda Instructions (Istruzioni) (IFU) in Resources (Risorse) sulla pagina del prodotto
all’indirizzo www.streck.com.
Le marche e i nomi degli strumenti sono marchi registrati dei rispettivi titolari.
Vedere www.streck.com/patents per i brevetti che potrebbero essere applicabili a questo prodotto.
